Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GCN5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400767-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GCN5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GCN5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GCN5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KAT2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GCN5 Anticorpo (A-11): sc-365321
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCN5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400767-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GCN5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400767-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KAT2A codifica a acetiltransferase de lisina GCN5, uma subunidade catalítica dos complexos coativadores SAGA/ATAC que acetilam a histona H3 (notavelmente H3K9 e H3K14) para promover a acessibilidade da cromatina e a ativação transcricional. Por meio da regulação coordenada da atividade de enhancers e promotores, a GCN5 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e programas de diferenciação específicos de linhagem. A GCN5 também acetila substratos não histônicos, conectando a dinâmica de acetilação a redes de sinalização e ao estado metabólico. A atividade desregulada de KAT2A/GCN5 e padrões alterados de acetilação de histonas têm sido associados a programas transcricionais oncogênicos e a distúrbios do desenvolvimento, tornando-a um alvo útil para estudar o controle epigenético da expressão gênica.
GCN5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KAT2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KAT2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KAT2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KAT2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.