GBP4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405870

Descripción general

La proteína 4 de unión a guanilato (GBP4) es una GTPasa grande inducible por interferón que participa en la inmunidad intrínseca celular aguas abajo de la señalización de interferón de tipo I y tipo II. GBP4 está implicada en programas efectores de la inmunidad innata que modulan la restricción de patógenos, la señalización inflamatoria y las respuestas antivirales, con vínculos funcionales a redes transcripcionales impulsadas por JAK–STAT y a las vías de genes estimulados por interferón. Al influir en los estados de activación de las células inmunitarias y en procesos regulados por citocinas, la expresión y la actividad de GBP4 se examinan con frecuencia en contextos de biología de la infección y fisiopatología asociada al sistema inmunitario. Su papel en la coordinación de respuestas dependientes de GTPasas convierte a GBP4 en un nodo útil para estudiar la remodelación dependiente del estímulo de los programas de defensa celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GBP4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GBP4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GBP4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GBP4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GBP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GBP4 para la investigación de la señalización de GBP4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GBP4 críticos para la función de GBP4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GBP4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GBP4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GBP4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GBP4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GBP4 (h) y el plásmido HDR GBP4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GBP4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GBP4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.