GBP4 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405870

Panoramica

La guanilato binding protein 4 (GBP4) è una grande GTPasi inducibile dagli interferoni che partecipa all’immunità cellulo-intrinseca a valle della segnalazione degli interferoni di tipo I e di tipo II. GBP4 è implicata in programmi effettrici dell’immunità innata che modulano la restrizione dei patogeni, la segnalazione infiammatoria e le risposte antivirali, con legami funzionali alle reti trascrizionali guidate da JAK–STAT e alle vie dei geni stimolati dagli interferoni. Influenzando gli stati di attivazione delle cellule immunitarie e i processi regolati dalle citochine, l’espressione e l’attività di GBP4 vengono spesso esaminate in contesti di biologia delle infezioni e di fisiopatologia associata al sistema immunitario. Il suo ruolo nel coordinare risposte dipendenti dalle GTPasi rende GBP4 un nodo utile per studiare il rimodellamento, dipendente dallo stimolo, dei programmi di difesa cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO GBP4 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene GBP4 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del GBP4 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto GBP4 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina GBP4.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di GBP4 per lo studio della segnalazione di GBP4, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni GBP4 critici per la funzione di GBP4
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di GBP4 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal GBP4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal GBP4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus GBP4. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal GBP4 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR GBP4 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia GBP4 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio GBP4 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.