GBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402792

概要

グアニル酸結合タンパク質3（GBP3）は、I型／II型インターフェロンシグナル伝達の下流で作動する自然免疫防御プログラムに関与する、ヒトのインターフェロン誘導性大型GTPアーゼです。GBP3は、インターフェロン刺激遺伝子（ISG）ネットワークを協調的に制御し、さらにインフラマソーム関連経路とのクロストークを含む、病原体制限や炎症性プロセスを調節することで、細胞自律的な抗菌・抗ウイルス応答に寄与します。GBP3の発現パターンの変化は免疫調節異常や炎症状態と関連づけられており、感染生物学や腫瘍—免疫相互作用の文脈でしばしば研究されています。インターフェロン駆動型シグナルのマーカー兼メディエーターとして、GBP3はサイトカイン応答、宿主—病原体相互作用、ならびに免疫関連の転写プログラムを解析するうえで重要です。

GBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGBP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GBP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GBP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GBP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GBP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GBP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GBP3の機能に不可欠なGBP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GBP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GBP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GBP3 HDRプラスミド（h）および GBP3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGBP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGBP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。