GBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401778

概要

グアニル酸結合タンパク質1（GBP1）は、自然免疫のエフェクターとして機能する、大型のインターフェロン誘導性ダイナミン様GTPアーゼである。I型およびII型インターフェロンに応答してJAK/STATシグナル伝達の下流で強力に発現が誘導され、病原体を含む区画を標的とするとともに、抗菌・炎症プログラムを調節することで、細胞自律的防御に関与する。GBP1は、インフラマソーム関連応答、細胞内輸送、細胞骨格リモデリングなどの過程に関連付けられており、上皮バリア生物学や免疫細胞活性化において文脈依存的な役割を担うことが示されている。GBP1の発現変動は、慢性炎症状態、感染症モデル、腫瘍関連免疫微小環境でしばしば観察されるため、インターフェロン刺激遺伝子（ISG）ネットワークを研究する上で有用な結節点となる。

GBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGBP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GBP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GBP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GBP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GBP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GBP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GBP1の機能に不可欠なGBP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GBP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGBP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GBP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GBP1 HDRプラスミド（h）および GBP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGBP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGBP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。