Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
GATA-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400724
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GATA-6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GATA-6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GATA-6 Anticuerpo (3H3-H6-H11): sc-517554
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GATA-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400724 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
GATA6 codifica GATA-6, un factor de transcripción con dedos de zinc que se une a motivos GATA para regular la especificación de linaje y los programas de diferenciación en tejidos derivados del endodermo y del mesodermo. Participa en redes transcripcionales con factores como NKX2-5 y miembros de la familia TBX para coordinar la organogénesis y las decisiones de destino celular, y se integra con señales de vías como WNT, BMP y TGF-β. En células adultas, GATA-6 contribuye a la regulación génica epitelial y del músculo liso, al metabolismo celular y a la remodelación transcripcional sensible al estrés. La actividad desregulada de GATA6 se ha asociado con defectos del desarrollo y se estudia con frecuencia en el contexto de estados de diferenciación alterados y dependencias transcripcionales observadas en múltiples modelos de enfermedad, incluido el cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GATA-6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GATA6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GATA6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GATA6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GATA-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GATA6 para la investigación de la señalización de GATA-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GATA6 críticos para la función de GATA-6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GATA6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GATA-6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GATA-6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GATA6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GATA-6 (h) y el plásmido HDR GATA-6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GATA6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GATA6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.