gasdermin C Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429915

Descripción general

El gen murino **Gsdmc** codifica la gasdermina C, un miembro de la familia de las gasderminas implicado en la muerte celular regulada y en la permeabilización inflamatoria de la membrana aguas abajo de la activación de proteasas. Las gasderminas pueden actuar como ejecutoras de procesos similares a la piroptosis al formar poros en la membrana plasmática, influyendo así en la liberación de citocinas, la integridad de la barrera epitelial y la señalización inmunitaria innata. La expresión de **Gsdmc** está enriquecida en contextos epiteliales y se ha vinculado a respuestas al estrés que se entrecruzan con la inflamación impulsada por NF-κB y con programas de remodelación tisular. Por lo tanto, la actividad desregulada de las gasderminas es relevante para el estudio de la patología inflamatoria, las interacciones huésped–microbio y los fenotipos de muerte celular asociados al cáncer en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO gasdermin C (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gsdmc en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gsdmc junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gsdmc tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína gasdermin C.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gsdmc para la investigación de la señalización de gasdermin C, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gsdmc críticos para la función de gasdermin C
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gsdmc para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido gasdermin C CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido gasdermin C CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gsdmc. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR gasdermin C (m) y el plásmido HDR gasdermin C (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gsdmc para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gsdmc definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.