Gas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420490

概要

Growth arrest–specific 6（Gas6）はビタミンK依存性の分泌性リガンドであり、主としてAXL、MERTK、TYRO3からなるTAM受容体型チロシンキナーゼに結合して、細胞の生存、増殖、遊走応答を調節します。TAMシグナル伝達を介して、Gas6は下流のPI3K–AKT、MAPK/ERK、NF-κB経路に影響を及ぼし、ホスファチジルセリン依存的な認識を通じてアポトーシス細胞のクリアランスも促進します。マウス系では、Gas6は自然免疫の恒常性、マクロファージによるエフェロサイトーシス、炎症トーンの調節に関与するとされ、線維化、血栓形成、ならびに微小環境における腫瘍—免疫相互作用などの過程とも関連します。

Gas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGas6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gas6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gas6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Gas6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Gas6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gas6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Gas6の機能に不可欠なGas6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gas6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Gas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGas6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gas6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Gas6 HDRプラスミド（m）および Gas6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGas6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGas6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。