GARNL4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411668-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GARNL4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GARNL4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GARNL4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAP1GAP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GARNL4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411668-NIC | 20 µg | $410.00 |
RAP1GAP2 codifica GARNL4, uma proteína ativadora de GTPase (GAP) de Rap que acelera a hidrólise de GTP em Rap1/Rap2, limitando a sinalização de pequenas GTPases na membrana plasmática e no citoesqueleto. Ao modular o controlo dependente de Rap da ativação de integrinas, da adesão celular e da remodelação de actina, a GARNL4 contribui para a regulação da sinalização, do tráfego e das respostas acopladas a estímulos em plaquetas e leucócitos. Esta via de RAP cruza-se com redes ligadas a MAPK/ERK e PI3K por meio de recetores a montante e complexos adaptadores, moldando os limiares de ativação celular e a dinâmica de secreção. A desregulação da sinalização de Rap e alterações na atividade de GAP são frequentemente estudadas em contextos de hemostase anómala, sinalização inflamatória e alterações associadas ao cancro na adesão e migração.
GARNL4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAP1GAP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAP1GAP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAP1GAP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAP1GAP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.