gamma Synuclein/SNCG CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401050

概要

SNCGはガンマシヌクレインをコードしており、細胞骨格の構築制御、小胞輸送、細胞ストレス応答の調節に関与するとされる小型のシナプス前終末関連タンパク質です。非神経系の文脈では、SNCGの発現は、微小管ダイナミクスと膜輸送およびプロテオスタシスを結び付ける経路を介した、細胞運動性やシグナル伝達の変化と関連付けられています。ガンマシヌクレインの発現異常は複数の腫瘍タイプで報告されており、浸潤、転移関連表現型、ならびに細胞ストレス耐性との関連で頻繁に研究されています。シヌクレインファミリーの一員として、SNCGはまた、多様な細胞システムにおけるタンパク質凝集の生物学や、シナプス様小胞プロセスを検討するための比較モデルにもなります。

gamma Synuclein/SNCG CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSNCG遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SNCG内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SNCGのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、gamma Synuclein/SNCGタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、gamma Synuclein/SNCGシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SNCG欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• gamma Synuclein/SNCGの機能に不可欠なSNCGエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SNCGゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• gamma Synuclein/SNCG CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびgamma Synuclein/SNCG CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SNCG遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  gamma Synuclein/SNCG HDRプラスミド（h）および gamma Synuclein/SNCG HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSNCGホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSNCG標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。