GALE Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408127-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GALEO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GALE (h) e o Plasmídeo Double Nickase GALE (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GALE. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GALE Anticorpo (C-4): sc-390407
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GALE Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408127-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GALE Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408127-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GALE codifica a UDP-galactose-4-epimerase, uma enzima citosólica que interconverte de forma reversível UDP-galactose e UDP-glicose e também catalisa a epimerização UDP-GalNAc/UDP-GlcNAc necessária para o metabolismo de aminoaçúcares. Por meio dessas reações, GALE dá suporte à via de Leloir de utilização da galactose e fornece substratos de açúcares nucleotídicos para a glicosilação, influenciando a biossíntese de proteoglicanos e glicoproteínas na via secretória. A perturbação da atividade de GALE desorganiza a homeostase de carboidratos da célula e pode alterar a composição dos glicanos, com efeitos a jusante sobre o dobramento, o tráfego e a sinalização de proteínas. Disfunções de GALE em humanos estão associadas a formas de galactosemia, tornando o gene um alvo útil para estudar respostas ao estresse metabólico e fenótipos ligados à glicosilação em sistemas modelo.
GALE O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GALE em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GALE. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GALE. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GALE interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.