GADD 45γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402483
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GADD 45γ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GADD 45γ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GADD 45γ Anticorpo (B-1): sc-393261
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GADD 45γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402483 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GADD45G (GADD45γ) é um membro induzível por estresse da família de proteínas induzíveis por parada de crescimento e dano ao DNA (GADD45), que conecta sinais genotóxicos e inflamatórios ao controle do ciclo celular, ao reparo do DNA e à apoptose. Ela modula a sinalização de MAPKs, incluindo as vias p38 e JNK, e interage com a regulação de checkpoints para promover a parada em G2/M e a manutenção da estabilidade genômica sob estresse celular. Em células humanas, a expressão alterada de GADD45γ tem sido associada à proliferação desregulada, a respostas ao estresse prejudicadas e à sinalização de sobrevivência aberrante em múltiplos contextos de doença, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de adaptação ao estresse. Seu papel na integração de estímulos ambientais com programas transcricionais e de checkpoint sustenta pesquisas sobre respostas a dano ao DNA, senescência e vias semelhantes às de supressores tumorais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GADD 45γ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GADD45G em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GADD45G, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GADD45G na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GADD 45γ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GADD45G para a investigação da sinalização de GADD 45γ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GADD45G críticos para a função GADD 45γ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GADD45G para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GADD 45γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GADD 45γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GADD45G. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GADD 45γ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GADD 45γ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GADD45G para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GADD45G definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.