Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GAD-65 Antibody (A-3): sc-377145. Near-infrared western blot analysis of GAD-65 expression in rat cerebellum (A) and rat brain (D) tissue extracts and U-87 MG (B) and EOC 20 (C) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
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GAD-65双切口酶质粒(h): sc-402137-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GAD-65 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GAD-65双切酶质粒（h）和GAD-65双切酶质粒（h2）编码针对GAD2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GAD-65: sc-377145，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GAD-65双切口酶质粒(h) | sc-402137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GAD-65双切口酶质粒(h2) | sc-402137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **GAD2** 基因编码谷氨酸脱羧酶 65（GAD-65）。GAD-65 是一种依赖磷酸吡哆醛（PLP）的酶，催化谷氨酸转化为 γ-氨基丁酸（GABA）和 CO₂。GAD-65 在突触前末梢中富集，支持活动依赖性的 GABA 合成及囊泡神经递质循环，将氨基酸代谢与抑制性突触传递和神经元兴奋性联系起来。作为决定兴奋–抑制平衡的关键因素，GAD2/GAD-65 的表达或功能异常与神经发育和神经精神障碍、癫痫以及应激相关环路等研究机制密切相关。GAD-65 还是 1 型糖尿病研究中表征充分的自身抗原，可用于在非神经元背景下探究免疫识别与抗原呈递通路。
GAD-65 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GAD2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GAD2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GAD2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GAD2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。