Plásmido Doble Nickase (m) G530011O06Rik: sc-437289-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)G530011O06Rik consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa G530011O06Rik (m) y el plásmido de doble nickasa G530011O06Rik (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a G530011O06Rik. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) G530011O06Rik | sc-437289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) G530011O06Rik | sc-437289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse G530011O06Rik codifica una proteína en gran medida no caracterizada y con anotación funcional limitada, lo que lo convierte en un objetivo útil para el descubrimiento sistemático de la función génica. Los patrones de expresión y las características predichas sugieren posibles funciones en procesos celulares fundamentales, como la regulación de la expresión génica, el metabolismo del ARN o la homeostasis proteica, aunque aún falta establecer con certeza su pertenencia a una vía concreta. La perturbación de loci con escasa anotación como G530011O06Rik puede revelar fenotipos dependientes del contexto vinculados al control del ciclo celular, las respuestas al estrés o la especificación de linaje. En consecuencia, G530011O06Rik es relevante para estudios exploratorios que conectan el genotipo con fenotipos moleculares y celulares en modelos cercanos a enfermedades, sin presuponer un mecanismo específico.
G530011O06Rik El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus G530011O06Rik en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de G530011O06Rik. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de G530011O06Rik. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con G530011O06Rik alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.