G3BP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424175-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- G3BP1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase G3BP1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase G3BP1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para G3bp1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
G3BP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424175-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
G3BP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424175-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **G3bp1** de camundongo codifica a G3BP1, uma proteína multifuncional de ligação a RNA que integra o metabolismo de mRNA às respostas celulares ao estresse. A G3BP1 é um arcabouço central dos grânulos de estresse e influencia o início da tradução, a estabilidade do mRNA e a montagem de ribonucleoproteínas, conectando esses processos a vias de sinalização como o reconhecimento imune inato e a sinalização de estresse mediada por quinases. Por seus papéis na dinâmica de grânulos citoplasmáticos de RNA e nas interações proteína–RNA, alterações na atividade de G3BP1 são estudadas em contextos que incluem neurodegeneração, respostas antivirais e adaptação de células tumorais ao estresse.
G3BP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus G3bp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de G3bp1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função G3bp1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com G3bp1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.