Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FXYD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406431
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FXYD3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FXYD3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FXYD3 Anticorpo (A-8): sc-271808
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FXYD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406431 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FXYD3 (dysadherina) é um membro da família FXYD de pequenas proteínas de membrana de passagem única que modulam a atividade da Na⁺/K⁺-ATPase, influenciando assim a homeostase iónica, o potencial de membrana e a fisiologia do transporte epitelial. Ao regular a cinética da bomba e, a jusante, afetar o volume celular e a sinalização, a FXYD3 pode impactar processos como proliferação, respostas ao stress e a dinâmica de adesão célula–célula. Alterações na expressão de FXYD3 foram descritas em múltiplos contextos de cancro e são frequentemente estudadas pelas suas ligações à motilidade e invasividade de células tumorais, bem como a mudanças no estado epitelial. Como regulador associado à superfície, também é relevante para investigações sobre redes de proteínas de membrana e vias acopladas à Na⁺/K⁺-ATPase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FXYD3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FXYD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FXYD3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FXYD3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FXYD3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FXYD3 para a investigação da sinalização de FXYD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FXYD3 críticos para a função FXYD3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FXYD3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FXYD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FXYD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FXYD3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FXYD3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FXYD3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FXYD3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FXYD3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.