FucT-IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420427
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FucT-IX O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FucT-IX, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FucT-IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420427 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Fut9** de camundongo codifica a **fucosiltransferase IX (FucT-IX)**, uma **α1,3-fucosiltransferase** residente no **Golgi** que catalisa a fucosilação terminal de **N-glicanos** e **glicolipídios**, contribuindo para a síntese de epítopos do tipo Lewis, como o **Lewis X**. Essa atividade de glicosilação modula a adesão célula–célula, o tráfego de receptores e a transdução de sinais ao moldar interações dependentes de glicanos entre proteínas de membrana e ligantes extracelulares. A fucosilação dependente de **Fut9** é frequentemente estudada no contexto de programas de desenvolvimento e de processos relacionados ao sistema imune, nos quais motivos de glicanos regulam a adesão de leucócitos e o padrão de organização tecidual. Padrões desregulados de fucosilação e alterações na expressão de antígenos Lewis também são usados como leituras moleculares em modelos de inflamação e de transformação oncogênica, sem implicar utilidade clínica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FucT-IX (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fut9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fut9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fut9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FucT-IX.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fut9 para a investigação da sinalização de FucT-IX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fut9 críticos para a função FucT-IX
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fut9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FucT-IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FucT-IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fut9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FucT-IX Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FucT-IX (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fut9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fut9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.