Plásmido Doble Nickase (h) FOXD1: sc-402521-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FOXD1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FOXD1 (h) y el plásmido de doble nickasa FOXD1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FOXD1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FOXD1 Anticuerpo (2C10): sc-293238
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FOXD1 | sc-402521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FOXD1 | sc-402521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXD1 codifica un factor de transcripción de la familia forkhead box que regula programas de expresión génica dependientes del contexto y que controlan la especificación del destino celular, la diferenciación y el patrón tisular. En el desarrollo humano, FOXD1 se asocia especialmente con linajes mesenquimales y con la morfogénesis renal, al influir en redes transcripcionales que coordinan la señalización estroma–epitelio, la organización de la matriz extracelular y la organogénesis. La desregulación de la expresión de FOXD1 se ha relacionado con alteraciones en el compromiso de linaje y en vías de remodelación que convergen con el control del ciclo celular y con cascadas de señalización del desarrollo. Como proteína nuclear de unión al ADN, FOXD1 constituye un nodo útil para analizar la regulación transcripcional, la actividad de potenciadores (enhancers) y la intercomunicación entre vías del desarrollo en modelos celulares relevantes para enfermedades.
FOXD1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FOXD1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FOXD1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FOXD1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FOXD1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.