FOXC1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403113-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXC1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXC1 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXC1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FOXC1 Antibody (4D11): sc-293455
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXC1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXC1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXC1 (forkhead box C1) è un fattore di trascrizione a elica alata che regola programmi di espressione genica che controllano lo sviluppo embrionale, la specificazione del destino cellulare e la definizione dei pattern tissutali, con ruoli di rilievo nella formazione del segmento anteriore dell’occhio, nella morfogenesi cranio-facciale e nella biologia vascolare. Attraverso il legame al DNA in modo sequenza-specifico, FOXC1 coordina reti trascrizionali che si intersecano con vie di segnalazione dello sviluppo come TGF-β/BMP e Wnt, influenzando le decisioni di linea cellulare e il rimodellamento della matrice extracellulare. Un’attività deregolata di FOXC1 è stata associata a disgenesie congenite del segmento anteriore, incluse le manifestazioni dello spettro di Axenfeld–Rieger, e contribuisce a stati trascrizionali aberranti osservati in diversi tumori. Nei modelli cellulari, FOXC1 è spesso studiato per la sua influenza sulla transizione epitelio–mesenchimale, su fenotipi simil-staminali e su effetti dipendenti dal contesto su proliferazione, migrazione e risposte allo stress.
FOXC1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.