Formin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410431-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Formin 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Formin 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Formin 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FMN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Formin 1 Anticorpo (H-5): sc-515698
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Formin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410431-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Formin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410431-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FMN1 codifica a formina 1, um membro da família de forminas relacionadas à diaphanous, que nucleia e alonga filamentos de actina não ramificados para organizar a arquitetura do citoesqueleto. A formina 1 sustenta processos dinâmicos, incluindo polaridade celular, adesão, migração e citocinese, ao coordenar a montagem de actina e a comunicação cruzada com a sinalização de GTPases da família Rho e o acoplamento entre microtúbulos e actina. Por meio dessas funções, FMN1 contribui para a morfogênese tecidual e para comportamentos de células neuronais e mesenquimais nos quais é necessária uma remodelação precisa da actina. A desregulação do controle do citoesqueleto mediado por forminas tem sido associada a invasividade alterada, anomalias do desenvolvimento e outros fenótipos relevantes para patologias em sistemas modelo, o que motiva estudos mecanísticos da dinâmica de actina dependente de FMN1.
Formin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FMN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FMN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FMN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FMN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.