Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FMO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406605
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FMO3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FMO3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FMO3 Anticorpo (C-1): sc-515042
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FMO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406605 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FMO3 codifica a monooxigenase 3 contendo flavina, uma monooxigenase microsomal dependente de NADPH, altamente ativa no fígado humano, que catalisa a N-oxigenação e a S-oxigenação de diversos xenobióticos e aminas endógenas. Ao converter trimetilamina (TMA) em N-óxido de trimetilamina (TMAO), a FMO3 relaciona o metabolismo de nutrientes da dieta com a bioquímica redox hepática e com os perfis sistêmicos de metabólitos. A atividade da FMO3 contribui para a capacidade de desintoxicação e influencia a sinalização mediada por metabólitos por meio de interações com redes mais amplas de biotransformação de fase I/fase II. Alterações genéticas ou funcionais na FMO3 estão associadas a mudanças na oxidação de aminas, incluindo a trimetilaminúria, e são frequentemente estudadas no contexto da variação interindividual no metabolismo de fármacos e na modulação de características metabólicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FMO3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FMO3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FMO3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FMO3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FMO3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FMO3 para a investigação da sinalização de FMO3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FMO3 críticos para a função FMO3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FMO3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FMO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FMO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FMO3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FMO3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FMO3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FMO3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FMO3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.