FKBP25 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410783-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FKBP25O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FKBP25 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FKBP25 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FKBP3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FKBP25 Anticorpo (H-6): sc-374357
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FKBP25 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410783-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKBP25 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410783-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O FKBP3 humano codifica a FKBP25, uma imunofilina nuclear com atividade de isomerase peptidil-prolil cis–trans, que atua como chaperona de dobramento proteico e como proteína de suporte (scaffold) em processos associados à cromatina. A FKBP25 interage com o DNA e com reguladores transcricionais para influenciar programas de expressão gênica, e tem sido associada à regulação da biogênese de ribossomos, às respostas a danos no DNA e à sinalização adaptativa ao estresse. Por meio dessas atividades, a FKBP25 contribui para o controle da progressão do ciclo celular e da homeostase proteica, vias frequentemente alteradas em contextos de doenças proliferativas e neurodegenerativas. Alterações na expressão ou na localização de FKBP3/FKBP25 foram relatadas em diversos cenários relevantes para doenças, o que sustenta seu uso como um nó mecanístico para estudar o controle de qualidade de proteínas nucleares e a regulação transcricional.
FKBP25 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FKBP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FKBP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FKBP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FKBP3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.