FGF-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401243

概要

FGF7は線維芽細胞増殖因子7（FGF-7、角化細胞増殖因子［keratinocyte growth factor］としても知られる）をコードしており、主に間葉系細胞で産生される傍分泌性リガンドです。FGF-7は主として上皮細胞を標的とするFGFR2bを介してシグナルを伝達します。このシグナル伝達軸は上皮の増殖・遊走・分化を制御し、下流のMAPK/ERK、PI3K/AKTなどの増殖因子関連経路を通じて、組織修復やバリア維持に寄与します。FGF7–FGFR2bシグナルの異常は、上皮過形成、線維化に伴うリモデリング、ならびに癌の増殖や浸潤に影響を与える腫瘍—間質相互作用への関与が示唆されています。上皮—間葉クロストークのモデル因子として、FGF-7は創傷治癒、気道および消化管上皮の恒常性、微小環境依存的なシグナル伝達などの文脈で頻繁に研究されています。

FGF-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFGF7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FGF7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FGF7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FGF-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FGF-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FGF7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FGF-7の機能に不可欠なFGF7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FGF7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FGF-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFGF-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FGF7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FGF-7 HDRプラスミド（h）および FGF-7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFGF7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFGF7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。