FGF-6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405239

Descripción general

FGF6 codifica el factor de crecimiento de fibroblastos 6 (FGF-6), un ligando de señalización secretado que interactúa principalmente con los receptores FGFR para activar las vías MAPK/ERK, PI3K/AKT y PLCγ. Contribuye a la regulación de la proliferación, la supervivencia y la diferenciación celular, con funciones destacadas en el desarrollo y la regeneración del músculo esquelético, así como en la remodelación tisular. Las alteraciones en la señalización de FGF6 pueden perturbar programas transcripcionales impulsados por factores de crecimiento y procesos asociados a la matriz extracelular, lo que lo hace relevante para estudios sobre señalización proliferativa desregulada y especificación de linaje. En sistemas celulares humanos, FGF-6 constituye un nodo manejable para investigar la comunicación cruzada entre factores de crecimiento y la salida de la vía FGFR dependiente del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FGF-6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FGF6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FGF6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FGF6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FGF-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FGF6 para la investigación de la señalización de FGF-6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FGF6 críticos para la función de FGF-6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FGF6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FGF-6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FGF-6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FGF6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FGF-6 (h) y el plásmido HDR FGF-6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FGF6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FGF6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.