FGF-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400324-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FGF-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FGF-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FGF-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FGF2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FGF-2 Anticorpo (G-2): sc-365106
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FGF-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400324-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FGF-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400324-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGF2 codifica o fator de crescimento de fibroblastos 2 (FGF-2), um fator de crescimento multifuncional ligante de heparina que sinaliza por meio de FGFRs para regular a proliferação, a sobrevivência, a migração e a diferenciação em linhagens mesenquimais e neurais. O FGF-2 é um mediador central da angiogênese e do remodelamento tecidual, coordenando interações com a matriz extracelular e a sinalização parácrina no microambiente estromal. A jusante, ele ativa as cascatas canônicas MAPK/ERK e PI3K/AKT, com conexões adicionais às vias de PLCγ e STAT, que modulam a progressão do ciclo celular e respostas ao estresse. A atividade desregulada de FGF2 e a alteração do output da via FGFR estão associadas à progressão tumoral e à neovascularização, bem como a processos de remodelamento fibrótico e inflamatório, tornando-o um alvo frequente em estudos mecanísticos de sinalização por fatores de crescimento.
FGF-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FGF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FGF2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FGF2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FGF2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.