FGF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401725
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FGF-19 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FGF-19, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FGF-19 Anticorpo (H-12): sc-390621
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FGF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401725 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FGF19 codifica o fator de crescimento de fibroblastos 19 (FGF-19), um FGF endócrino que sinaliza principalmente por meio do FGFR4 em conjunto com o co-receptor β-Klotho, regulando a homeostase metabólica. Em hepatócitos e enterócitos, o FGF-19 participa do controle por retroalimentação dos ácidos biliares ao suprimir o CYP7A1 e ao integrar-se a programas de transcrição dirigidos por FXR que influenciam o metabolismo de lipídios e glicose. A sinalização a jusante envolve MAPK/ERK e cascatas de quinases relacionadas, ligando o FGF-19 ao crescimento celular, à diferenciação e à adaptação metabólica específica de tecidos. A expressão ou sinalização desregulada de FGF19 tem sido associada a alterações no metabolismo de ácidos biliares e a fenótipos de doenças metabólicas, e é frequentemente estudada no contexto de sinalização de crescimento aberrante na biologia do câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FGF-19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FGF19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FGF19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FGF19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FGF-19.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FGF19 para a investigação da sinalização de FGF-19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FGF19 críticos para a função FGF-19
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FGF19 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FGF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FGF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FGF19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FGF-19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FGF-19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FGF19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FGF19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.