FAM118A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412412

概要

FAM118Aは保存性の高い核内タンパク質をコードしており、RNAプロセシングやリボヌクレオタンパク質複合体の機能を含む基本的なRNA代謝に関与すると考えられています。これは、遺伝子発現の恒常性を維持する役割と整合的です。近年の機能解析研究からは、FAM118Aが細胞増殖および生存プログラムの制御に寄与し、増殖能の維持やストレス適応を支える経路と関連する可能性が示唆されています。FAM118Aの発現異常は複数の疾患状況、特にがんで報告されており、転写レベルおよび転写後レベルでのリモデリングと関連する可能性があります。そのためFAM118Aは、RNA制御ネットワークが形質転換や組織恒常性に関わる細胞表現型へどのように影響するのかを解明する上で注目されています。

FAM118A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM118A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM118A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM118Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM118Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM118Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM118A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM118Aの機能に不可欠なFAM118Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM118Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM118A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAM118A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM118A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM118A HDRプラスミド（h）および FAM118A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM118Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM118A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。