FAAP20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-410649

概要

FAAP20（Fanconi anemia core complex–associated protein 20）は、複製ストレス下でゲノム安定性を支えるファンコニ貧血（FA）DNA修復ネットワークの構成要素です。FAコア複合体と結合し、相互鎖間架橋（interstrand crosslink）の修復に必要なFA経路の活性化に寄与することで、損傷部位の処理と複製フォークの保護を協調させます。これらの機能を通じて、FAAP20はDNA架橋損傷に対する細胞の感受性に影響し、染色体の完全性維持に関与します。FAAP20を含むFA経路構成因子の機能異常は、DNA修復能の低下や突然変異の蓄積と関連し、がん生物学や遺伝性の染色体不安定症候群に関わることが示されています。

FAAP20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAAP20遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAAP20内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAAP20のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAAP20タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAAP20シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAAP20欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAAP20の機能に不可欠なFAAP20エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAAP20ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAAP20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAAP20 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAAP20遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAAP20 HDRプラスミド（h）および FAAP20 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAAP20ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAAP20標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。