Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Espin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403106
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Espin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Espin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Espin Anticorpo (E-7): sc-393469
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Espin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403106 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ESPN codifica a espina, uma proteína que agrupa (empacota) filamentos de actina e se localiza em feixes paralelos de filamentos de actina, sendo enriquecida em microvilosidades e estereocílios. A espina regula a arquitetura do citoesqueleto, incluindo o alongamento e a estabilização de protrusões, moldando assim a morfologia da superfície celular e estruturas mecanossensoriais. Por meio da modulação da dinâmica da actina e de ligações cruzadas entre filamentos, a espina influencia processos como a organização da borda em escova epitelial e a manutenção dos estereocílios de células ciliadas. Alterações na função de ESPN têm sido associadas a fenótipos sensoriais e do citoesqueleto relevantes para a biologia da audição e para distúrbios estruturais impulsionados pela actina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Espin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ESPN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ESPN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ESPN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Espin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ESPN para a investigação da sinalização de Espin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ESPN críticos para a função Espin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ESPN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Espin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Espin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ESPN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Espin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Espin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ESPN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ESPN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.