ERp57 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420698

개요

Pdia3는 ERp57(또는 PDIA3/GRP58로도 알려짐)을 암호화하며, ERp57은 소포체 내강의 티올–이황화 결합 산화환원효소로서 칼넥신(calnexin) 및 칼레티큘린(calreticulin)과 협력해 새로 합성되는 당단백질의 산화적 접힘과 품질 관리를 촉진합니다. ERp57은 이황화 결합 형성을 통해 소포체 단백질 항상성(프로테오스타시스)을 지원하고, 미접힘 단백질 반응(UPR) 신호, 소포체 연관 분해(ERAD), 그리고 산화환원 항상성과도 밀접하게 연결되어 있습니다. 소포체 내강을 넘어 PDIA3는 MHC class I 펩타이드 적재를 통한 항원 제시에 관여하고, 세포 스트레스 적응과 연관된 신호 전달 경로의 조절에도 관여하는 것으로 보고되었습니다. PDIA3/ERp57 활성의 이상 조절은 신경퇴행성 및 대사 질환 모델을 포함해 단백질 독성 및 산화 스트레스가 특징인 여러 상태와 연관되어 있어, 소포체 스트레스와 면역 관련 과정의 기전 연구에서 중요한 표적으로 여겨집니다.

ERp57 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pdia3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pdia3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pdia3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ERp57 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ERp57 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pdia3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ERp57 기능에 중요한 Pdia3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pdia3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ERp57 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ERp57 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pdia3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ERp57 HDR 플라스미드 (m) 및 ERp57 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pdia3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pdia3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.