Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Ero1-Lα Antibody (D-7): sc-365526. Near-infrared western blot analysis of Ero1-Lα expression in HeLa (A), MDA-MB-435S (B), RAW 264.7 (C) and NIH/3T3 (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181.
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Ero1-Lα双切口酶质粒(h): sc-401747-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Ero1-Lα 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Ero1-Lα双切酶质粒（h）和Ero1-Lα双切酶质粒（h2）编码针对ERO1A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Ero1-Lα: sc-365526，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Ero1-Lα双切口酶质粒(h) | sc-401747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ero1-Lα双切口酶质粒(h2) | sc-401747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 ERO1A 基因编码内质网氧化还原酶 Ero1-Lα。Ero1-Lα 是一种 FAD 依赖性酶，通过将蛋白二硫键异构酶（PDI）重新氧化，以维持内质网中的氧化性蛋白折叠。Ero1-Lα 通过向分子氧转移电子，促进二硫键形成，并影响细胞氧化还原平衡、过氧化氢产生以及内质网蛋白稳态（ER proteostasis）。ERO1A 的活性与未折叠蛋白反应（UPR）信号及分泌通路成熟相互交织，进而影响糖蛋白装配与质量控制等过程。文献报道 ERO1A 的失调与内质网应激适应和氧化还原重塑有关，涉及肿瘤生物学与代谢功能障碍等背景，因此是进行机制研究的一个有用靶点。
Ero1-Lα 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ERO1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ERO1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ERO1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ERO1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。