ERdj3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404935

개요

DNAJB11은 ER 내강에 존재하는 Hsp40 보조 샤페론인 ERdj3를 암호화하며, BiP/HSPA5와 협력해 새로 합성된 분비 단백질 및 막 단백질의 접힘을 촉진하고 응집을 제한합니다. ERdj3는 BiP의 ATPase 활성을 자극하고, ER-연관 분해(ERAD)와 연결된 품질관리 결정을 조율하며, ER 스트레스 동안 미접힘 단백질 반응(UPR) 신호를 조절함으로써 소포체 단백질 항상성(proteostasis)에 관여합니다. 이러한 기능을 통해 DNAJB11은 분비 경로의 효율과 잘못 접힌 단백질 부하에 대한 세포의 적응에 영향을 미치며, 이 과정들은 신장 및 간 병태생리뿐 아니라 암과 연관된 스트레스 반응 등 단백질 항상성 불균형이 특징인 질환들과 관련되어 있습니다. 또한 샤페론 네트워크에서의 역할 때문에, ER 스트레스가 세포사멸, 염증, 대사 재구성과 어떻게 통합되는지를 연구하는 데에도 중요합니다.

ERdj3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DNAJB11 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DNAJB11 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DNAJB11의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ERdj3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ERdj3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DNAJB11 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ERdj3 기능에 중요한 DNAJB11 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DNAJB11 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ERdj3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ERdj3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DNAJB11 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ERdj3 HDR 플라스미드 (h) 및 ERdj3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DNAJB11 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DNAJB11 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.