Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EphB3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403039-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphB3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EphB3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EphB3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPHB3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphB3 Anticorpo (A-12): sc-514139
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphB3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403039-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphB3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403039-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHB3 codifica a tirosina-quinase receptora EphB3, um membro da família de receptores de efrina que medeia sinalização dependente de contato ao se ligar a ligantes efrina-B ancorados à membrana. A EphB3 regula a comunicação célula–célula, a remodelação do citoesqueleto, a adesão e a migração direcional por meio de vias que convergem com as GTPases da família Rho, a sinalização MAPK/ERK e redes associadas à PI3K. No desenvolvimento e na homeostase tecidual, a EphB3 contribui para a formação de fronteiras, a orientação axonal e a organização epitelial, e sua desregulação está ligada a programas alterados de invasão e diferenciação em múltiplos contextos de câncer. Essas propriedades tornam o EPHB3 um alvo útil para dissecar os desfechos de sinalização acionados por receptores e o comportamento celular em sistemas modelo.
EphB3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPHB3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPHB3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPHB3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPHB3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.