Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) EphB3: sc-403039-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)EphB3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa EphB3 (h) y el plásmido de doble nickasa EphB3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EPHB3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: EphB3 Anticuerpo (A-12): sc-514139
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) EphB3 | sc-403039-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) EphB3 | sc-403039-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHB3 codifica la tirosina cinasa receptora EphB3, un miembro de la familia de receptores de efrinas que media señalización dependiente de contacto al unirse a ligandos de efrina-B anclados a la membrana. EphB3 regula la comunicación célula–célula, la remodelación del citoesqueleto, la adhesión y la migración direccional mediante vías que convergen con las GTPasas de la familia Rho, la señalización MAPK/ERK y redes asociadas a PI3K. Durante el desarrollo y la homeostasis tisular, EphB3 contribuye a la formación de límites, la guía axonal y la organización epitelial, y su desregulación se asocia con programas alterados de invasión y diferenciación en múltiples contextos de cáncer. Estas propiedades convierten a EPHB3 en un objetivo útil para desentrañar los resultados de señalización impulsados por receptores y el comportamiento celular en sistemas modelo.
EphB3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EPHB3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EPHB3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EPHB3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EPHB3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.