EphA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420197
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphA7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EphA7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphA7 Anticorpo (E-7): sc-393973
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420197 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Epha7 codifica o EphA7, uma tirosina-quinase receptora da família Eph/ephrina que media sinalização dependente de contato para regular o posicionamento celular, a adesão e a orientação repulsiva durante o desenvolvimento. A ativação de EphA7 influencia a remodelação do citoesqueleto e vias a jusante, como a sinalização por GTPases da família Rho, MAPK/ERK e processos dependentes de PI3K, que moldam a migração, a formação de fronteiras e o direcionamento axonal. Em tecidos de camundongo, o EphA7 está implicado no padrão de organização neural e na montagem de circuitos, em que alterações na sinalização Eph/ephrina podem perturbar a conectividade e a organização tecidual. A desregulação da sinalização associada ao EphA7 tem sido estudada em modelos de anormalidades do neurodesenvolvimento e de biologia tumoral, por meio de efeitos sobre proliferação, invasão e interações com o microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EphA7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Epha7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Epha7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Epha7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EphA7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Epha7 para a investigação da sinalização de EphA7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Epha7 críticos para a função EphA7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Epha7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EphA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo EphA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Epha7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EphA7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR EphA7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Epha7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Epha7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.