Date published: 2026-8-27

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ENX-2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420258-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • ENX-2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase ENX-2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ENX-2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ezh1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ENX-2 Anticorpo (H-4): sc-515817
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    ENX-2 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-420258-NIC
    20 µg
    $410.00

    Ezh1 codifica a ENX-2, um componente central do complexo repressivo Polycomb 2 (PRC2) que catalisa a metilação de H3K27 na histona H3 para manter a repressão transcricional e a estabilidade da cromatina em células de camundongo. Em conjunto com outras subunidades do PRC2, a ENX-2 ajuda a regular programas gênicos do desenvolvimento, a identidade de células-tronco e progenitoras e a diferenciação específica de linhagens por meio do silenciamento epigenético. O remodelamento de cromatina impulsionado por Ezh1 interage com vias que governam o controle do ciclo celular e a homeostase tecidual, influenciando estados de expressão gênica dependentes do contexto. Alterações na atividade do PRC2 e nas paisagens de metilação de H3K27 são amplamente estudadas em modelos de diferenciação aberrante e desregulação transcricional oncogênica.

    ENX-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ezh1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ezh1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ezh1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ezh1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.