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ENX-1双切口酶质粒(h) | sc-417028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENX-1双切口酶质粒(h2) | sc-417028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EZH2 编码组蛋白甲基转移酶 ENX-1,它是多梳抑制复合体 2(PRC2)的催化亚基,负责沉积 H3K27me3,从而实现转录沉默与表观遗传记忆的维持。通过 PRC2 介导的染色质压缩,ENX-1 通过调控发育与信号通路相关基因位点的可及性,参与谱系决定、细胞周期程序、DNA 损伤应答以及干细胞样状态的维持。EZH2 活性失调与染色质状态改变相关,这些改变可在多种肿瘤背景下支持致癌性转录程序并导致异常分化。作为核心表观遗传调控因子,EZH2 常被用于研究调控增殖、上皮–间质可塑性以及免疫相关基因表达的通路。
ENX-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EZH2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EZH2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EZH2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EZH2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。