CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
ENOPH1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-426793-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- ENOPH1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- ENOPH1ダブルニカースプラスミド（m）およびENOPH1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Enoph1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: ENOPH1 抗体 (H-10): sc-365155
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
ENOPH1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-426793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENOPH1 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-426793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Enoph1 はマウスの ENOPH1 酵素をコードしており、細胞内のレドックス制御やチオール依存性プロセスに関与する代謝タンパク質です。細胞のエネルギー状態を解毒やストレス適応経路と結び付ける役割を担うと考えられています。ENOPH1 の活性は、グルタチオン関連代謝およびその関連中間体の文脈で語られることが多く、酸化ストレスへの対処、ミトコンドリア機能、全体的な代謝恒常性に影響を及ぼします。これらのプロセスが乱れると、代謝活性の高い組織における増殖や生存プログラムに影響し得るため、代謝機能不全やストレス関連表現型の研究において重要です。そのため Enoph1 は、レドックス緩衝能や低分子代謝がマウスモデルにおける細胞生理をどのように形作るかを解析するうえで有用な標的となります。
ENOPH1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Enoph1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Enoph1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Enoph1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Enoph1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。