eIF4AIII Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402660-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF4AIIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF4AIII (h) e o Plasmídeo Double Nickase eIF4AIII (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF4A3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF4AIII Anticorpo (B-2): sc-365549
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4AIII Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402660-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF4AIII Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402660-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A3 codifica a eIF4AIII, uma helicase de RNA da família DEAD-box que atua como componente central do complexo de junção de éxons, acoplando o splicing do pré-mRNA aos processos subsequentes de exportação, localização e tradução do mRNA, bem como à degradação mediada por códons de parada prematuros (nonsense-mediated decay). Ao se fixar ao RNA de maneira dependente de ATP, a eIF4AIII ajuda a definir a arquitetura das ribonucleoproteínas mensageiras pós-splicing e influencia a vigilância de transcritos e a fidelidade do proteoma. Alterações na função ou na expressão de EIF4A3 têm sido associadas a programas desregulados de processamento de RNA relevantes para fenótipos do neurodesenvolvimento e para mudanças na expressão gênica associadas ao câncer. Como resultado, EIF4A3 é frequentemente estudado em vias que regulam o metabolismo de RNA, os desfechos de splicing em escala genômica e o controle translacional responsivo ao estresse.
eIF4AIII O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF4A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF4A3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF4A3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF4A3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.