eIF3ζ Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424946-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF3ζO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF3ζ (m) e o Plasmídeo Double Nickase eIF3ζ (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Eif3d. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF3ζ Anticorpo (H-7): sc-271515
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF3ζ Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424946-NIC | 20 µg | $410.00 |
Eif3d codifica, no camundongo, a subunidade zeta do fator eucariótico de iniciação da tradução 3 (eIF3ζ), um componente do complexo multiproteico eIF3 que coordena a montagem do complexo de pré-iniciação 43S e promove uma tradução eficiente de mRNAs dependente de cap. Ao regular a eficiência de iniciação e a seleção de mRNAs, o eIF3ζ influencia a homeostase do proteoma e se integra a vias de sinalização que controlam crescimento, adaptação ao estresse e progressão do ciclo celular, incluindo o controle traducional regulado por mTOR. Alterações em fatores de iniciação da tradução são frequentemente associadas a proliferação e aptidão celular modificadas, tornando Eif3d um locus útil para estudar programas de síntese proteica desregulados em contextos relevantes para doenças.
eIF3ζ O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Eif3d em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Eif3d. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Eif3d. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Eif3d interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.