Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
eIF3η Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400817
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF3η O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eIF3η, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF3η Anticorpo (C-5): sc-137214
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF3η Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400817 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
EIF3B codifica uma subunidade central do complexo do fator de iniciação da tradução eucariótica 3 (eIF3), a eIF3η, que coordena o recrutamento da subunidade ribossomal 40S e a montagem do complexo de pré-iniciação durante a tradução dependente de cap. Por meio de interações com outros fatores de iniciação e com o mRNA, a eIF3η auxilia na seleção do códon de iniciação e controla a eficiência de tradução de transcritos ligados ao crescimento, ao metabolismo e à adaptação ao estresse. A função de EIF3B se cruza com vias que regulam a proteostase e a progressão do ciclo celular, e a desregulação da iniciação da tradução é frequentemente associada à sinalização oncogênica e a alterações na aptidão celular. Como um nó central no controle translacional, EIF3B é comumente estudado em contextos de proliferação, respostas ao estresse e alterações na síntese proteica associadas à transformação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eIF3η (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EIF3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EIF3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EIF3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eIF3η.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EIF3B para a investigação da sinalização de eIF3η, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EIF3B críticos para a função eIF3η
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EIF3B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eIF3η Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo eIF3η Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EIF3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eIF3η Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR eIF3η (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EIF3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EIF3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.