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Egr-2双切口酶质粒(h) | sc-401203-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Egr-2双切口酶质粒(h2) | sc-401203-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EGR2 编码 Egr-2,这是一种锌指转录因子,可被细胞外信号快速诱导,从而编排细胞命运决定以及长期的转录响应。在人类细胞中,Egr-2 调控参与周围神经发育与髓鞘形成、免疫细胞分化与免疫耐受,以及活动依赖性转录重塑的基因网络。它与 MAPK/ERK 驱动的即刻早期基因信号通路相互衔接,并在谱系特异性靶基因位点调节染色质状态与启动子占据。EGR2 活性失调及其下游转录程序的改变与遗传性和获得性神经病变以及免疫功能障碍相关,这表明它在神经—免疫基因调控机制研究中具有重要意义。
Egr-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EGR2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EGR2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EGR2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EGR2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。