Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EB1 Antibody (1A11/4): sc-47704. Western blot analysis of EB1 expression in HEK293 (A), Jurkat (B), Ramos (C), A-431 (D) and HeLa (E) whole cell lysates and human brain tissue extract (F).
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EB1双切口酶质粒(h): sc-401367-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EB1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EB1双切酶质粒（h）和EB1双切酶质粒（h2）编码针对MAPRE1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EB1: sc-47704，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EB1双切口酶质粒(h) | sc-401367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EB1双切口酶质粒(h2) | sc-401367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPRE1 编码末端结合蛋白 1（end-binding protein 1，EB1）。EB1 是微管正端（+端）追踪蛋白（+TIP）中的核心成员，能够识别 GTP-微管蛋白帽，并协调微管的生长与稳定。EB1 作为 +TIP 网络的支架蛋白，将动态微管与动粒及细胞皮层连接起来，以支持纺锤体组装、染色体分离以及定向细胞迁移。通过与 APC、CLIP 蛋白以及动力蛋白/动力蛋白复合体（dynein/dynactin）调控因子的相互作用，EB1 将微管动力学与有丝分裂进程及细胞极性通路整合起来。在癌症相关的细胞生物学研究中，MAPRE1/EB1 功能与表达的失调与染色体稳定性改变及细胞骨架重塑等现象相关。
EB1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MAPRE1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAPRE1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MAPRE1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MAPRE1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。