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Drebrin双切口酶质粒(h) | sc-403241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Drebrin双切口酶质粒(h2) | sc-403241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DBN1 编码 drebrin(肌动蛋白结合蛋白),该蛋白在神经元中富集,参与调控细胞骨架重塑、生长锥动力学以及树突棘形态。Drebrin 可调节肌动蛋白丝的组织方式,并通过调控细胞黏附、神经突起生长及突触后致密区(PSD)组装等通路,将突触信号与结构性可塑性相耦联。DBN1 表达水平及 drebrin 的定位异常与突触稳定性和神经环路功能改变有关,并有研究报道其与神经发育性和神经退行性表型存在关联。在非神经元背景下,drebrin 也参与膜突起形成、细胞运动等依赖肌动蛋白的过程,因此是研究细胞骨架调控的重要对象。
Drebrin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DBN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DBN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DBN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DBN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。