Plásmido Doble Nickase (h) DOM3Z: sc-409469-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DOM3Z consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DOM3Z (h) y el plásmido de doble nickasa DOM3Z (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DXO. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DOM3Z Anticuerpo (D-9): sc-393167
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DOM3Z | sc-409469-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DOM3Z | sc-409469-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DXO (también conocido como DOM3Z) codifica una enzima de descapado de ARN y exonucleasa de tipo metalo-β-lactamasa que contribuye al control de calidad del ARN en el citoplasma. DOM3Z participa en vías de vigilancia que eliminan ARN con caperuzas anómalas o procesados de forma incompleta, modulando así la estabilidad del ARNm y acoplando el descapado a la degradación de ARN en dirección 5′→3′. Al influir en el recambio de transcritos defectuosos y de intermediarios de degradación, DXO ayuda a mantener la fidelidad del transcriptoma durante las respuestas celulares al estrés y el procesamiento del ARN. La desregulación de las redes de degradación y vigilancia del ARN se asocia con frecuencia a programas de expresión génica alterados observados en cáncer y en contextos neurodegenerativos e inflamatorios, lo que convierte a DXO en una diana relevante para estudios mecanísticos.
DOM3Z El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DXO en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DXO. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DXO. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DXO alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.