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DnaJC3慢病毒激活颗粒(h) | sc-405100-LAC | 200 µl | $455.00 |
DNAJC3 编码驻留于内质网的共伴侣蛋白 DnaJC3(又称 p58IPK)。它属于 Hsp40/DnaJ 家族,在内质网应激过程中调控蛋白质稳态。DnaJC3 参与未折叠蛋白反应(UPR),并通过与 PERK/EIF2AK3 及其他翻译调控因子和伴侣蛋白活性调节因子相互作用,减弱与应激相关的信号传导,从而影响蛋白质稳态、内质网相关降解(ERAD)以及细胞对错误折叠蛋白的适应。遗传学与机制研究提示,DNAJC3 功能改变与应激信号失调和对蛋白毒性更易感有关,并与代谢及神经退行性表型相关。因此,DNAJC3 是在人类细胞模型中解析内质网应激回路、翻译调控,以及 UPR 信号与炎症通路串扰的一个有用节点。
DnaJC3 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DNAJC3 表达。
DnaJC3 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DNAJC3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DnaJC3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DNAJC3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。