DNA pol θ慢病毒激活颗粒(h): sc-407414-LAC

POLQ 基因编码 DNA 聚合酶 θ（DNA pol θ），这是一种易出错的 A 家族聚合酶，具有 N 端类解旋酶结构域，可在 DNA 损伤位点协调末端连接以及有限的 DNA 合成。DNA pol θ 是聚合酶 θ 介导的末端连接（TMEJ）的核心组分。TMEJ 是一种依赖微同源序列的修复通路，在同源重组受损时可修复双链断裂并促进基因组稳定性。通过其在替代性末端连接中的作用，POLQ 会影响复制应激耐受性、染色体重排，以及与基因组不稳定性相关的突变特征。POLQ 活性失调常在肿瘤相关的 DNA 修复网络重编程及对基因毒性应激的耐受/抗性机制研究中被重点关注，因此也与 DNA 损伤应答通路的功能基因组学研究密切相关。

DNA pol θ 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 POLQ 表达。

DNA pol θ 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在POLQ转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性DNA pol θ表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 POLQ 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。