非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DNA pol β (D-11): sc-376581. 非转染: sc-117752 (A) 和人 DNA pol β 转染: sc-111735 (B) 293T 全细胞裂解液中 DNA pol β 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DNA pol β双切口酶质粒(h): sc-402861-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DNA pol β 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DNA pol β双切酶质粒（h）和DNA pol β双切酶质粒（h2）编码针对POLB的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DNA pol β: sc-376581，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DNA pol β双切口酶质粒(h) | sc-402861-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNA pol β双切口酶质粒(h2) | sc-402861-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
POLB 编码 DNA 聚合酶 β（DNA pol β），它是碱基切除修复（BER）通路中的关键酶，在修复合成过程中负责填补单核苷酸缺口，并处理 5′-脱氧核糖磷酸（5′-dRP）中间体。DNA pol β 与 XRCC1、DNA 连接酶 III 以及 DNA 糖基化酶协同作用，帮助细胞在氧化损伤、烷基化以及碱基自发脱落后维持基因组完整性。POLB 活性或表达的异常与突变率升高和染色体不稳定性相关，使该通路与促进肿瘤发生及年龄相关基因组衰退的机制联系起来。作为 BER 的核心因子，DNA pol β 常被用于研究其对 DNA 损伤信号传导、复制压力应答以及细胞对基因毒性应激因子的敏感性的影响。
DNA pol β 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 POLB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对POLB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏POLB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了POLB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。