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DEC-205双切口酶质粒(h) | sc-417220-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DEC-205双切口酶质粒(h2) | sc-417220-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LY75 编码 DEC-205(CD205),这是一种 C 型凝集素内吞受体,在多种树突状细胞亚群中高表达,能够捕获糖基化抗原,并将其输送至内体和溶酶体区室进行加工处理。通过网格蛋白介导的摄取与囊泡运输,DEC-205 支持 MHC II 类抗原呈递,并可影响交叉呈递通路,从而塑造适应性免疫的启动。DEC-205 的结合还会与模式识别以及细胞因子驱动的调控程序发生交叉,进而调节树突状细胞的成熟、免疫耐受以及 T 细胞极化。涉及 LY75 的抗原处理异常和树突状细胞功能失调,与自身免疫、慢性炎症、感染生物学以及肿瘤免疫微环境等研究密切相关。
DEC-205 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LY75 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LY75内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LY75的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LY75基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。