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DDX60L慢病毒激活颗粒(h) | sc-413888-LAC | 200 µl | $455.00 |
DDX60L(DExD/H-box 解旋酶 60 样)编码一种由干扰素刺激诱导的 RNA 解旋酶,通过识别并加工病毒 RNA 分子参与先天性抗病毒防御。它与细胞质 RNA 感知以及 I 型干扰素相关的转录程序有关,并与 RNA 解旋酶和模式识别受体通路协同作用,共同塑造抗病毒限制效应。DDX60L 的活性已在干扰素信号传导动态、宿主–病毒相互作用,以及炎症应激条件下 RNA 代谢调控等背景中得到研究。在多种免疫介导性疾病以及病毒相关肿瘤微环境中,常可观察到包括 DDX60L 在内的干扰素刺激基因表达异常,这也支持其作为免疫学与感染生物学研究靶点的相关性。
DDX60L 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DDX60L 表达。
DDX60L 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DDX60L转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DDX60L表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DDX60L 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。