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DDX60慢病毒激活颗粒(h) | sc-408255-LAC | 200 µl | $455.00 |
DDX60 编码一种可被干扰素诱导的 DExD/H-box RNA 解旋酶,作为胞质内的传感器与放大器,参与抗病毒先天免疫反应。它通过促进病毒 RNA 的识别与加工,并增强限制病毒复制的下游转录程序,从而介入 RIG-I 样受体信号传导与 I 型干扰素通路。依靠其 RNA 结合与解旋活性,DDX60 会在细胞应激和感染过程中影响 RNA 代谢以及 ISG(干扰素刺激基因)表达的强度。DDX60 表达失衡与抗病毒反应改变及炎症信号异常有关,因此在宿主—病原体互作和免疫相关疾病机制研究中具有重要意义。
DDX60 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DDX60 表达。
DDX60 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DDX60转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DDX60表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DDX60 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。