Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DDX33 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432143-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX33O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDX33 (m) e o Plasmídeo Double Nickase DDX33 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dhx33. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX33 Anticorpo (B-4): sc-390573
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX33 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX33 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-432143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Dhx33 de camundongo codifica a DDX33, uma helicase de RNA da família DEAD-box implicada na remodelagem, dependente de ATP, de complexos RNA–proteína que dão suporte ao metabolismo de RNA e à tradução. A DDX33 tem sido associada à biogênese de ribossomos e à função nucleolar, influenciando o processamento de rRNA e a capacidade de síntese proteica durante o crescimento celular e a adaptação ao estresse. Por meio dessas atividades, a DDX33 se conecta a vias que controlam a proliferação e a sinalização imune inata, cujos desfechos dependem de um processamento de RNA regulado. A desregulação da função de helicases de RNA é amplamente relevante para programas oncogênicos e fenótipos inflamatórios, tornando Dhx33 um ponto útil para estudos mecanísticos do controle do estado celular centrado em RNA.
DDX33 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dhx33 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dhx33. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dhx33. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dhx33 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.